Χρήση χρήσης
Το Strongstep^®Η δοκιμή PROM είναι μια οπτικά ερμηνευμένη ανοσοχρωματογραφική δοκιμή που προορίζεται να χρησιμοποιηθεί για την ποιοτική ανίχνευση εμβρυϊκής ινονεκτίνης στις εκκρίσεις του τραχήλου της μήτρας. Η παρουσία εμβρυϊκής ινονεκτίνης στις εκκρίσεις του τραχήλου της μήτρας μεταξύ 22 εβδομάδων, 0 ημερών και 34 εβδομάδων,που σχετίζονται με αυξημένο κίνδυνο πρόωρου τοκετού.

Παρακράτηση
Η πρόωρη παράδοση, που ορίζεται από το Αμερικανικό Κολλέγιο Μαιευτήρων και Γυναικολόγων ως παράδοση πριν από την 37η εβδομάδα κύησης, είναι υπεύθυνη για την πλειονότητα της μη χρωμοσωμικής περιγεννητικής νοσηρότητας και θνησιμότητας. Τα συμπτώματα της απειλητικής πρόωρης παράδοσης περιλαμβάνουν συσπάσεις της μήτρας, αλλαγή κολπικής εκκένωσης, κολπική αιμορραγία, οσφυαλγία, κοιλιακή δυσφορία, πυελική πίεση και κράμπες. Οι διαγνωστικοί τρόποι για την ταυτοποίηση της απειλητικής πρόωρης παράδοσης περιλαμβάνουν την παρακολούθηση της δραστηριότητας της μήτρας και την απόδοση μιας ψηφιακής εξέτασης του τραχήλου της μήτρας, η οποία επιτρέπει την εκτίμηση των διαστάσεων του τραχήλου της μήτρας. Αυτές οι μέθοδοι έχουν αποδειχθεί ότι είναι περιορισμένες, καθώς η ελάχιστη διαστολή του τραχήλου της μήτρας (<3 εκατοστά) και η δραστικότητα της μήτρας εμφανίζονται κανονικά και δεν είναι απαραιτήτως διαγνωστικά της επικείμενης πρόωρης παράδοσης. Ενώ έχουν αξιολογηθεί αρκετοί βιοχημικοί δείκτες ορού, κανένας δεν έχει γίνει ευρέως αποδεκτός για πρακτική κλινική χρήση.

Η εμβρυϊκή ινονεκτίνη (FFN), μια ισομορφή ινωδονεκτίνης, είναι μια σύνθετη συγκολλητική γλυκοπρωτεΐνη με μοριακό βάρος περίπου 500.000 daltons. Η Matsuura και οι συνεργάτες του περιέγραψαν ένα μονοκλωνικό αντίσωμα που ονομάζεται FDC-6, το οποίο αναγνωρίζει ειδικά το III-CS, την περιοχή που ορίζει την εμβρυϊκή ισόμορφη ινονεκτίνης. Οι ανοσοϊστοχημικές μελέτες του Placentae έδειξαν ότι το FFN είναιπεριορίζεται στην εξωκυτταρική μήτρα της περιοχής που καθορίζει τη διασταύρωσητων μητρικών και εμβρυϊκών μονάδων εντός της μήτρας.

Η εμβρυϊκή ινονεκτίνη μπορεί να ανιχνευθεί σε εκκρίσεις των γυναικών του τραχήλου της μήτρας κατά τη διάρκεια της εγκυμοσύνης με τη χρήση ανοσοπροσδιορισμού με βάση το μονοκλωνικό αντίσωμα. Η εμβρυϊκή ινονεκτίνη είναι αυξημένη στις εκκρίσεις του τραχήλου της μήτρας κατά τη διάρκεια της πρώιμης εγκυμοσύνης, αλλά μειώνεται από 22 σε 35 εβδομάδες σε φυσιολογικές εγκυμοσύνες. Η σημασία της παρουσίας του στον κόλπο κατά τη διάρκεια των πρώτων εβδομάδων της εγκυμοσύνης δεν γίνεται κατανοητή. Ωστόσο, μπορεί απλώς να αντικατοπτρίζει την κανονική ανάπτυξη του εξωφρενικού πληθυσμού τροφοβλαστών και του πλακούντα. Η ανίχνευση του FFN στις εκκρίσεις του τραχήλου της μήτρας μεταξύ 22 εβδομάδων, 0 ημερών και 34 εβδομάδων, η κύηση 6 ημερών αναφέρεται ότι σχετίζεται με πρόωρη παράδοση σε συμπτωματική και μεταξύ 22 εβδομάδων, 0 ημερών και 30 εβδομάδων, 6 ημερών σε ασυμπτωματικές έγκυες γυναίκες.

ΑΡΧΗ
Το Strongstep^®Η δοκιμή FFN χρησιμοποιεί έγχρωμη ανοσοχρωματογραφική, τεχνολογία τριχοειδούς ροής. Η διαδικασία δοκιμής απαιτεί τη διαλυτοποίηση του FFN από ένα κολπικό στρώμα αναμειγνύοντας το στρώμα σε ρυθμιστικό δείγματος. Στη συνέχεια προστίθεται το μικτό buffer δείγματος στο δείγμα κασέτας δοκιμής καλά και το μείγμα μεταναστεύει κατά μήκος της επιφάνειας της μεμβράνης. Εάν υπάρχει FFN στο δείγμα, θα σχηματίσει ένα σύμπλεγμα με το πρωτογενές αντι-FFN αντίσωμα συζευγμένο με χρωματιστά σωματίδια. Το σύμπλεγμα θα δεσμεύεται στη συνέχεια από ένα δεύτερο αντι-FFN αντίσωμα επικαλυμμένο στη μεμβράνη νιτροκυτταρίνης. Η εμφάνιση μιας ορατής γραμμής δοκιμής μαζί με τη γραμμή ελέγχου θα υποδεικνύουν ένα θετικό αποτέλεσμα.

Εξαρτήματα κιτ

Απαιτούνται υλικά αλλά δεν παρέχονται

ΠΡΟΦΥΛΑΞΕΙΣ
■ Για επαγγελματική in vitro διαγνωστική χρήση μόνο.
■ Μην χρησιμοποιείτε μετά την ημερομηνία λήξης που αναφέρεται στη συσκευασία. Μην χρησιμοποιείτε τη δοκιμή εάν η θήκη του αλουμινίου είναι κατεστραμμένη. Μην επαναχρησιμοποιείτε τις δοκιμές.
■ Αυτό το κιτ περιέχει προϊόντα ζωικής προέλευσης. Η πιστοποιημένη γνώση της προέλευσης και/ή της υγιεινής κατάστασης των ζώων δεν εγγυάται πλήρως την απουσία μεταδοτικών παθογόνων παραγόντων. Επομένως, συνιστάται να αντιμετωπίζονται αυτά τα προϊόντα ως δυνητικά μολυσματικά και να αντιμετωπίζονται παρατηρώντας τις συνήθεις προφυλάξεις ασφαλείας (μην καταναλώνουν ή εισπνέουν).
■ Αποφύγετε τη διασταυρούμενη μόλυνση των δειγμάτων χρησιμοποιώντας ένα νέο δοχείο συλλογής δειγμάτων για κάθε ελήφθη δείγμα.
■ Διαβάστε προσεκτικά ολόκληρη τη διαδικασία πριν από την εκτέλεση οποιωνδήποτε δοκιμών.
■ Μην τρώτε, πίνετε ή καπνίζετε στην περιοχή όπου αντιμετωπίζονται τα δείγματα και τα κιτ. Χειριστείτε όλα τα δείγματα σαν να περιέχουν μολυσματικούς παράγοντες. Παρατηρήστε καθιερωμένες προφυλάξεις κατά των μικροβιολογικών κινδύνων σε όλη τη διαδικασία και ακολουθήστε τις τυπικές διαδικασίες για την ορθή διάθεση των δειγμάτων. Φορέστε προστατευτικά ρούχα όπως εργαστηριακά παλτά, γάντια διαθέσιμης χρήσης και προστασία των ματιών όταν προσδιοριστούν τα δείγματα.
■ Μην ανταλλάσσετε ή αναμιγνύετε αντιδραστήρια από διαφορετικές παρτίδες. Μην αναμιγνύετε τα καλύμματα φιαλών διαλύματος.
■ Η υγρασία και η θερμοκρασία μπορούν να επηρεάσουν δυσμενώς τα αποτελέσματα.
■ Όταν ολοκληρωθεί η διαδικασία προσδιορισμού, απορρίψτε προσεκτικά τα επιχρίσματα μετά από αυτόκλειστο στους 121 ° C για τουλάχιστον 20 λεπτά. Εναλλακτικά, μπορούν να υποβληθούν σε θεραπεία με 0,5% υποχλωριού νατρίου (ή λευκαντικό χλωρίδας) για μία ώρα πριν από τη διάθεση. Τα χρησιμοποιούμενα υλικά δοκιμών πρέπει να απορρίπτονται σύμφωνα με τους τοπικούς, κρατικούς ή/και ομοσπονδιακούς κανονισμούς.
■ Μην χρησιμοποιείτε κυτταρολογικές βούρτσες με έγκυους ασθενείς.

Αποθήκευση και σταθερότητα
■ Το κιτ θα πρέπει να αποθηκεύεται στους 2-30 ° C έως ότου η ημερομηνία λήξης εκτυπωθεί στην σφραγισμένη θήκη.
■ Η δοκιμή πρέπει να παραμείνει στη σφραγισμένη θήκη μέχρι τη χρήση.
■ Μην παγώσετε.
■ Θα πρέπει να ληφθούν φροντίδες για την προστασία των εξαρτημάτων σε αυτό το κιτ από τη μόλυνση. Μην χρησιμοποιείτε εάν υπάρχουν ενδείξεις μικροβιακής μόλυνσης ή βροχοπτώσεων. Η βιολογική μόλυνση του εξοπλισμού διανομής, των εμπορευματοκιβωτίων ή των αντιδραστηρίων μπορεί να οδηγήσει σε ψευδή αποτελέσματα.

Συλλογή και αποθήκευση pecimen
■ Χρησιμοποιήστε μόνο αποστειρωμένα επιχρίσματα dacron ή rayon με πλαστικούς άξονες. Συνιστάται να χρησιμοποιήσετε το στύλο που παρέχεται από τον κατασκευαστή κιτ (τα επιχρίσματα δεν περιέχονται σε αυτό το κιτ, για τις πληροφορίες παραγγελίας, παρακαλούμε επικοινωνήστε με τον κατασκευαστή ή τον τοπικό διανομέα, ο αριθμός του καταλόγου είναι 207000). Τα επιχρίσματα από άλλους προμηθευτές δεν έχουν επικυρωθεί. Τα επιχρίσματα με συμβουλές βαμβακιού ή ξύλινους άξονες δεν συνιστώνται.
■ Οι εκκρίσεις του τραχήλου της μήτρας λαμβάνονται από το οπίσθιο fornix του κόλπου. Η διαδικασία συλλογής προορίζεται να είναι ευγενής. Δεν απαιτείται έντονη ή ισχυρή συλλογή, κοινή για μικροβιολογικές καλλιέργειες. Κατά τη διάρκεια μιας εξέτασης speculum, πριν από οποιαδήποτε εξέταση ή χειραγώγηση του τραχήλου ή του κολπικού σωλήνα, περιστρέψτε ελαφρά την άκρη του εφαρμοστή κατά μήκος του οπίσθιου fornix του κόλπου για περίπου 10 δευτερόλεπτα για να απορροφήσετε τις αυχενικές εκκρίσεις. Οι επακόλουθες προσπάθειες κορεσμού της άκρης εφαρμογής μπορεί να ακυρώσουν τη δοκιμή. Αφαιρέστε το Applicator και εκτελέστε τη δοκιμή σύμφωνα με τις παρακάτω.
■ Τοποθετήστε το στύγμα στον σωλήνα εξαγωγής, εάν η δοκιμή μπορεί να εκτελεστεί αμέσως. Εάν δεν είναι δυνατή η άμεση δοκιμή, τα δείγματα ασθενών πρέπει να τοποθετηθούν σε ένα ξηρό σωλήνα μεταφοράς για αποθήκευση ή μεταφορά. Τα επιχρίσματα μπορούν να αποθηκευτούν για 24 ώρες σε θερμοκρασία δωματίου (15-30 ° C) ή 1 εβδομάδα στους 4 ° C ή όχι περισσότερο από 6 μήνες στους -20 ° C. Όλα τα δείγματα θα πρέπει να επιτρέπεται να φτάσουν σε θερμοκρασία δωματίου 15-30 ° C πριν από τη δοκιμή.

ΔΙΑΔΙΚΑΣΙΑ
Φέρτε δοκιμές, δείγματα, ρυθμιστικά και/ή χειριστήρια σε θερμοκρασία δωματίου (15-30 ° C) πριν από τη χρήση.
■ Τοποθετήστε έναν καθαρό σωλήνα εκχύλισης στην καθορισμένη περιοχή του σταθμού εργασίας. Προσθέστε 1ml ρυθμιστικού διαλύματος εκχύλισης στον σωλήνα εκχύλισης.
■ Τοποθετήστε το στρώμα του δείγματος στο σωλήνα. Ανακατέψτε έντονα το διάλυμα περιστρέφοντας το στρώμα έντονα από την πλευρά του σωλήνα για τουλάχιστον δέκα φορές (ενώ βυθιστείτε). Τα καλύτερα αποτελέσματα επιτυγχάνονται όταν το δείγμα αναμειγνύεται έντονα στο διάλυμα.
■ Σπρώξτε όσο το δυνατόν περισσότερο υγρό από το στρώμα, τσιμπώντας την πλευρά του εύκαμπτου σωλήνα εκχύλισης καθώς αφαιρείται το επιχρίσμα. Τουλάχιστον το 1/2 του ρυθμιστικού διαλύματος δείγματος πρέπει να παραμείνει στο σωλήνα για την επαρκή τριχοειδή μετανάστευση. Βάλτε το καπάκι στον εξαγόμενο σωλήνα.
Απορρίψτε το στύγμα σε ένα κατάλληλο δοχείο βιολογικών αποβλήτων.
■ Τα εκχυλισμένα δείγματα μπορούν να διατηρηθούν σε θερμοκρασία δωματίου για 60 λεπτά χωρίς να επηρεάσουν το αποτέλεσμα της δοκιμής.
■ Αφαιρέστε τη δοκιμή από τη σφραγισμένη θήκη της και τοποθετήστε την σε μια καθαρή επιφάνεια επιπέδου. Επισημάνετε τη συσκευή με την αναγνώριση ασθενούς ή ελέγχου. Για να επιτευχθεί το καλύτερο αποτέλεσμα, ο προσδιορισμός πρέπει να εκτελεστεί εντός μιας ώρας.
■ Προσθέστε 3 σταγόνες (περίπου 100 μΐ) εκχυλισμένου δείγματος από το σωλήνα εκχύλισης στο δείγμα καλά στην κασέτα δοκιμής.
Αποφύγετε την παγίδευση φυσαλίδων αέρα στο φρεάτιο του δείγματος και μην ρίξετε καμία λύση στο παράθυρο παρατήρησης.
Καθώς η δοκιμή αρχίζει να λειτουργεί, θα δείτε το χρώμα να κινείται σε όλη τη μεμβράνη.
■ Περιμένετε να εμφανιστεί η έγχρωμη ζώνη. Το αποτέλεσμα πρέπει να διαβαστεί στα 5 λεπτά. Μην ερμηνεύετε το αποτέλεσμα μετά από 5 λεπτά.
Απορρίψτε τους χρησιμοποιημένους δοκιμαστικούς σωλήνες και τις κασέτες δοκιμής σε κατάλληλο δοχείο βιολογικών αποβλήτων.
Εκμετάλλευση αποτελεσμάτων