ΣΤΟΙΧΕΙΑ ΧΡΗΣΗΣ
Το Δυνατό Βήμα^®Το PROM test είναι μια οπτικά ερμηνευόμενη ανοσοχρωματογραφική εξέταση που προορίζεται να χρησιμοποιηθεί για την ποιοτική ανίχνευση της εμβρυϊκής ινονεκτίνης στις τραχηλικές εκκρίσεις του κόλπου.Η παρουσία εμβρυϊκής φιμπρονεκτίνης στις τραχηλικοκολπικές εκκρίσεις μεταξύ 22 εβδομάδων, 0 ημερών και 34 εβδομάδων, 6 ημερών κύησης είναισχετίζεται με αυξημένο κίνδυνο πρόωρου τοκετού.

ΕΙΣΑΓΩΓΗ
Ο πρόωρος τοκετός, που ορίζεται από το Αμερικανικό Κολλέγιο Μαιευτήρων και Γυναικολόγων ως τοκετός πριν από την 37η εβδομάδα κύησης, είναι υπεύθυνος για την πλειοψηφία της μη χρωμοσωμικής περιγεννητικής νοσηρότητας και θνησιμότητας.Τα συμπτώματα του επαπειλούμενου πρόωρου τοκετού περιλαμβάνουν συσπάσεις της μήτρας, αλλαγή κολπικής έκκρισης, κολπική αιμορραγία, οσφυαλγία, κοιλιακή δυσφορία, πυελική πίεση και κράμπες.Οι διαγνωστικές μέθοδοι για τον εντοπισμό του επαπειλούμενου πρόωρου τοκετού περιλαμβάνουν παρακολούθηση της δραστηριότητας της μήτρας και διεξαγωγή ψηφιακής εξέτασης του τραχήλου της μήτρας, η οποία επιτρέπει την εκτίμηση των διαστάσεων του τραχήλου της μήτρας.Αυτές οι μέθοδοι έχουν αποδειχθεί περιορισμένες, καθώς η ελάχιστη διάταση του τραχήλου της μήτρας (< 3 εκατοστά) και η δραστηριότητα της μήτρας συμβαίνουν φυσιολογικά και δεν είναι απαραίτητα διαγνωστικά για επικείμενο πρόωρο τοκετό.Ενώ έχουν αξιολογηθεί αρκετοί βιοχημικοί δείκτες ορού, κανένας δεν έχει γίνει ευρέως αποδεκτός για πρακτική κλινική χρήση.

Η εμβρυϊκή φιμπρονεκτίνη (fFN), μια ισομορφή της ινονεκτίνης, είναι μια σύνθετη συγκολλητική γλυκοπρωτεΐνη με μοριακό βάρος περίπου 500.000 daltons.Ο Matsuura και οι συνεργάτες του έχουν περιγράψει ένα μονοκλωνικό αντίσωμα που ονομάζεται FDC-6, το οποίο αναγνωρίζει συγκεκριμένα το III-CS, την περιοχή που ορίζει την εμβρυϊκή ισομορφή της φιμπρονεκτίνης.Ανοσοϊστοχημικές μελέτες πλακούντων έχουν δείξει ότι το fFN είναιπεριορίζεται στην εξωκυτταρική μήτρα της περιοχής που ορίζει τη διασταύρωσητων μητρικών και εμβρυϊκών μονάδων εντός της μήτρας.

Η εμβρυϊκή ινονεκτίνη μπορεί να ανιχνευθεί στις τραχηλικοκολπικές εκκρίσεις των γυναικών καθ' όλη τη διάρκεια της εγκυμοσύνης με τη χρήση ενός ανοσοπροσδιορισμού που βασίζεται σε μονοκλωνικά αντισώματα.Η εμβρυϊκή ινονεκτίνη είναι αυξημένη στις τραχηλικοκολπικές εκκρίσεις κατά την πρώιμη εγκυμοσύνη αλλά μειώνεται από 22 σε 35 εβδομάδες σε φυσιολογικές κυήσεις.Η σημασία της παρουσίας του στον κόλπο κατά τις πρώτες εβδομάδες της εγκυμοσύνης δεν είναι κατανοητή.Ωστόσο, μπορεί απλώς να αντανακλά τη φυσιολογική ανάπτυξη του πληθυσμού των εξωλάχτων τροφοβλάστη και του πλακούντα.Η ανίχνευση του fFN σε τραχηλικές εκκρίσεις μεταξύ 22 εβδομάδων, 0 ημερών και 34 εβδομάδων, 6 ημερών κύησης αναφέρεται ότι σχετίζεται με πρόωρο τοκετό σε συμπτωματική και μεταξύ 22 εβδομάδων, 0 ημερών και 30 εβδομάδων, 6 ημερών σε ασυμπτωματικές έγκυες γυναίκες.

ΑΡΧΗ
Το Δυνατό Βήμα^®Το fFN Test χρησιμοποιεί έγχρωμη ανοσοχρωματογραφική τεχνολογία τριχοειδούς ροής.Η διαδικασία δοκιμής απαιτεί τη διαλυτοποίηση του fFN από ένα κολπικό στυλεό με ανάμιξη του στυλεού σε ρυθμιστικό διάλυμα δειγμάτων.Στη συνέχεια, το ρυθμιστικό διάλυμα μικτού δείγματος προστίθεται στο πηγαδάκι του δείγματος κασέτας δοκιμής και το μείγμα μεταναστεύει κατά μήκος της επιφάνειας της μεμβράνης.Εάν υπάρχει fFN στο δείγμα, θα σχηματίσει ένα σύμπλοκο με το πρωτεύον αντίσωμα anti-fFN συζευγμένο με έγχρωμα σωματίδια.Το σύμπλοκο στη συνέχεια θα δεσμευτεί από ένα δεύτερο αντίσωμα αντι-fFN επικαλυμμένο στη μεμβράνη νιτροκυτταρίνης.Η εμφάνιση μιας ορατής γραμμής δοκιμής μαζί με τη γραμμή ελέγχου θα υποδηλώνει ένα θετικό αποτέλεσμα.

ΕΞΑΡΤΗΜΑΤΑ ΚΙΤ

ΥΛΙΚΑ ΑΠΑΙΤΟΥΜΕΝΑ ΑΛΛΑ ΔΕΝ ΠΑΡΕΧΟΝΤΑΙ

ΠΡΟΦΥΛΑΞΕΙΣ
■ Μόνο για επαγγελματική in vitro διαγνωστική χρήση.
■ Να μη χρησιμοποιείται μετά την ημερομηνία λήξης που αναγράφεται στη συσκευασία.Μη χρησιμοποιείτε το τεστ εάν η αλουμινένια θήκη του είναι κατεστραμμένη.Μην επαναχρησιμοποιείτε τα τεστ.
■ Αυτό το κιτ περιέχει προϊόντα ζωικής προέλευσης.Η πιστοποιημένη γνώση της προέλευσης και/ή της υγειονομικής κατάστασης των ζώων δεν εγγυάται πλήρως την απουσία μεταδοτικών παθογόνων παραγόντων.Ως εκ τούτου, συνιστάται η αντιμετώπιση αυτών των προϊόντων ως δυνητικά μολυσματικών και ο χειρισμός τους τηρώντας τις συνήθεις προφυλάξεις ασφαλείας (μην καταπίνετε ή εισπνέετε).
■ Αποφύγετε τη διασταυρούμενη μόλυνση των δειγμάτων χρησιμοποιώντας ένα νέο δοχείο συλλογής δειγμάτων για κάθε δείγμα που λαμβάνεται.
■ Διαβάστε προσεκτικά ολόκληρη τη διαδικασία πριν πραγματοποιήσετε οποιεσδήποτε δοκιμές.
■ Μην τρώτε, πίνετε ή καπνίζετε στην περιοχή όπου χειρίζεστε τα δείγματα και τα κιτ.Χειριστείτε όλα τα δείγματα σαν να περιέχουν μολυσματικούς παράγοντες.Τηρείτε τις καθιερωμένες προφυλάξεις κατά των μικροβιολογικών κινδύνων καθ' όλη τη διάρκεια της διαδικασίας και ακολουθήστε τις τυπικές διαδικασίες για τη σωστή απόρριψη των δειγμάτων.Φοράτε προστατευτικό ρουχισμό, όπως εργαστηριακές επικαλύψεις, γάντια μιας χρήσης και προστασία ματιών κατά την ανάλυση των δειγμάτων.
■ Μην ανταλλάσσετε ή αναμιγνύετε αντιδραστήρια από διαφορετικές παρτίδες.Μην αναμιγνύετε καπάκια φιαλών διαλύματος.
■ Η υγρασία και η θερμοκρασία μπορεί να επηρεάσουν αρνητικά τα αποτελέσματα.
■ Όταν ολοκληρωθεί η διαδικασία της ανάλυσης, πετάξτε τα επιχρίσματα προσεκτικά αφού τα τοποθετήσετε σε αυτόκαυστο στους 121°C για τουλάχιστον 20 λεπτά.Εναλλακτικά, μπορούν να υποβληθούν σε επεξεργασία με 0,5% υποχλωριούχο νάτριο (ή οικιακό λευκαντικό) για μία ώρα πριν από την απόρριψή τους.Τα χρησιμοποιημένα υλικά δοκιμής θα πρέπει να απορρίπτονται σύμφωνα με τους τοπικούς, πολιτειακούς ή/και ομοσπονδιακούς κανονισμούς.
■ Μη χρησιμοποιείτε κυτταρολογικές βούρτσες με έγκυες ασθενείς.

ΑΠΟΘΗΚΕΥΣΗ ΚΑΙ ΣΤΑΘΕΡΟΤΗΤΑ
■ Το κιτ πρέπει να φυλάσσεται στους 2-30°C μέχρι την ημερομηνία λήξης που αναγράφεται στη σφραγισμένη θήκη.
■ Η δοκιμή πρέπει να παραμείνει στη σφραγισμένη θήκη μέχρι τη χρήση.
■ Μην καταψύχετε.
■ Πρέπει να λαμβάνεται μέριμνα για την προστασία των εξαρτημάτων αυτού του κιτ από μόλυνση.Μην το χρησιμοποιείτε εάν υπάρχουν ενδείξεις μικροβιακής μόλυνσης ή καθίζησης.Η βιολογική μόλυνση του εξοπλισμού διανομής, των περιεκτών ή των αντιδραστηρίων μπορεί να οδηγήσει σε ψευδή αποτελέσματα.

ΣΥΛΛΟΓΗ ΚΑΙ ΑΠΟΘΗΚΕΥΣΗ ΔΕΙΜΕΝΩΝ
■ Χρησιμοποιείτε μόνο αποστειρωμένα μάκτρα Dacron ή Rayon με πλαστικούς άξονες.Συνιστάται η χρήση του μάκτρου που παρέχεται από τον κατασκευαστή του κιτ (Οι μπατονέτες δεν περιέχονται σε αυτό το κιτ, για πληροφορίες παραγγελίας, επικοινωνήστε με τον κατασκευαστή ή τον τοπικό διανομέα, ο αριθμός καταλόγου είναι 207000).Τα επιχρίσματα από άλλους προμηθευτές δεν έχουν επικυρωθεί.Δεν συνιστώνται μπατονέτες με βαμβακερές μύτες ή ξύλινους άξονες.
■ Οι αυχενικές εκκρίσεις λαμβάνονται από το οπίσθιο τμήμα του κόλπου.Η διαδικασία συλλογής προορίζεται να είναι ήπια.Δεν απαιτείται έντονη ή δυναμική συλλογή, συνηθισμένη για μικροβιολογικές καλλιέργειες.Κατά τη διάρκεια μιας εξέτασης με κάτοπτρο, πριν από οποιαδήποτε εξέταση ή χειρισμό του τραχήλου της μήτρας ή της κολπικής οδού, περιστρέψτε ελαφρά το άκρο του απλικατέρ κατά μήκος του οπίσθιου βυθού του κόλπου για περίπου 10 δευτερόλεπτα για να απορροφηθούν οι τραχηλικές εκκρίσεις του κόλπου.Μεταγενέστερες προσπάθειες κορεσμού του άκρου εφαρμογής μπορεί να ακυρώσουν τη δοκιμή.Αφαιρέστε το εφαρμοστή και εκτελέστε τη δοκιμή όπως υποδεικνύεται παρακάτω.
■ Τοποθετήστε το στυλεό στον σωλήνα εξαγωγής, εάν η δοκιμή μπορεί να γίνει αμέσως.Εάν δεν είναι δυνατός ο άμεσος έλεγχος, τα δείγματα ασθενών θα πρέπει να τοποθετηθούν σε σωλήνα ξηρής μεταφοράς για αποθήκευση ή μεταφορά.Τα επιχρίσματα μπορούν να φυλάσσονται για 24 ώρες σε θερμοκρασία δωματίου (15-30°C) ή 1 εβδομάδα στους 4°C ή όχι περισσότερο από 6 μήνες στους -20°C.Όλα τα δείγματα πρέπει να αφήνονται να φτάσουν σε θερμοκρασία δωματίου 15-30°C πριν από τη δοκιμή.

ΔΙΑΔΙΚΑΣΙΑ
Φέρτε τα τεστ, τα δείγματα, το ρυθμιστικό διάλυμα και/ή τους μάρτυρες σε θερμοκρασία δωματίου (15-30°C) πριν από τη χρήση.
■ Τοποθετήστε έναν καθαρό σωλήνα εξαγωγής στην καθορισμένη περιοχή του σταθμού εργασίας.Προσθέστε 1 ml ρυθμιστικού διαλύματος εκχύλισης στο σωληνάριο εκχύλισης.
■ Τοποθετήστε το στυλεό δείγματος στο σωληνάριο.Ανακατέψτε έντονα το διάλυμα περιστρέφοντας τη μπατονέτα με δύναμη στο πλάι του σωλήνα για τουλάχιστον δέκα φορές (ενώ είναι βυθισμένο).Τα καλύτερα αποτελέσματα επιτυγχάνονται όταν το δείγμα αναμειγνύεται έντονα στο διάλυμα.
■ Πιέστε όσο το δυνατόν περισσότερο υγρό από τη μπατονέτα τσιμπώντας την πλευρά του εύκαμπτου σωλήνα εξαγωγής καθώς αφαιρείται η μπατονέτα.Τουλάχιστον το 1/2 του ρυθμιστικού διαλύματος δείγματος πρέπει να παραμείνει στο σωληνάριο για να συμβεί επαρκής τριχοειδική μετανάστευση.Τοποθετήστε το καπάκι στον εξαγόμενο σωλήνα.
Απορρίψτε το στυλεό σε κατάλληλο δοχείο για βιολογικά επικίνδυνα απόβλητα.
■ Τα δείγματα που εξάγονται μπορούν να διατηρηθούν σε θερμοκρασία δωματίου για 60 λεπτά χωρίς να επηρεαστεί το αποτέλεσμα της δοκιμής.
■ Αφαιρέστε το τεστ από τη σφραγισμένη θήκη του και τοποθετήστε το σε μια καθαρή, επίπεδη επιφάνεια.Επισημάνετε τη συσκευή με την ταυτότητα ασθενούς ή ελέγχου.Για να επιτευχθεί το καλύτερο αποτέλεσμα, η ανάλυση θα πρέπει να εκτελείται εντός μίας ώρας.
■ Προσθέστε 3 σταγόνες (περίπου 100 µl) εξαγόμενου δείγματος από το Σωληνάριο Εκχύλισης στο πηγαδάκι δείγματος στην κασέτα δοκιμής.
Αποφύγετε την παγίδευση φυσαλίδων αέρα στο φρεάτιο δείγματος (S) και μην ρίχνετε κανένα διάλυμα στο παράθυρο παρατήρησης.
Καθώς η δοκιμή αρχίζει να λειτουργεί, θα δείτε το χρώμα να κινείται κατά μήκος της μεμβράνης.
■ Περιμένετε να εμφανιστούν οι έγχρωμες ταινίες.Το αποτέλεσμα πρέπει να διαβαστεί σε 5 λεπτά.Μην ερμηνεύσετε το αποτέλεσμα μετά από 5 λεπτά.
Απορρίψτε τους χρησιμοποιημένους δοκιμαστικούς σωλήνες και τις δοκιμαστικές κασέτες σε κατάλληλο δοχείο για βιολογικά επικίνδυνα απόβλητα.
ΕΡΜΗΝΕΙΑ ΑΠΟΤΕΛΕΣΜΑΤΩΝ